培育无病毒苗木

1、脱毒

脱毒是培育无病毒苗木的基础。采用热处理、茎尖培养、茎尖培养结合热处理等技术，能成功地脱除多种葡萄病毒，其中，茎尖培养结合热处理方法脱毒效果好。脱毒技术较易操作和掌握，所需仪器设备简单。中国农业科学果树研究所、国家落叶果树脱毒中心已通过脱毒处理和单株检测获得贝达、红地球、赤霞珠、夏黑、峰后等无病毒葡萄品种。

2、病毒检测

可靠、灵敏、快速的病毒检测技术是发展葡萄没有毒化栽培的根本保障。目前常用的葡

萄病毒检测方法主要有指示植物、酶联吸附（ELISA）和反转录聚合酶链式扩增反应（RT-PCR）等三种。成套的指示植物可用于检测多种葡萄病毒病，但由于该方法所需时间过长，因此多用于检测无病毒原种。ELISA方法检测样品量大、操作简单、所需时间短，可用于检测GFLV、ArMV、GLRaV-1~7、GVA、GVB、GFKV等多种葡萄病毒。目前我国所用的ELISA试剂盒全靠进口，费用较高。近年来，随着葡萄病毒分子生物学研究的深入，RT-PCR检测技术被越来越多地应用于葡萄病毒检测，目前GFLV、GLRaV、GVA、GVB、GFkV、ArMV等多种葡萄病毒均可用该方法进行检测。在我过，中国农业科学院果树研究所、国家落叶果树脱毒中心研究建立了GFkV、GLRaV、GVA、GVB等多种葡萄病毒RT-PCR检测方法体系，现已广泛应用于葡萄样品的快速检测。

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葡萄扇叶病

葡萄扇叶病（Fanleaf）由葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus，GFLV)侵染所致。春季症状明显，主要表现为叶片不对称，叶缘锯齿加深，叶柄凹大宽张，主脉异常聚近，呈扇状，有时伴有褪绿班驳；枝条扁化，分枝不正常，双芽，拐节，节间缩短；叶片常出现黄点（有时为环斑或线纹斑），后期发展为黄绿相间花叶，直至整叶变黄，黄化叶片逐渐变白，后脱落。其它线虫传多面体病毒侵染葡萄也会引起扇叶病症状，但在田间无法区分，只能通过实验鉴定才能明确。欧洲一些国家对比研究表明，受葡萄扇叶病毒侵染的葡萄，生根率可降低60%，枝条产出率减少46%，嫁接成活率降低30%~50%，产量损失达30%~80%。

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葡萄苗药的使用

石硫合剂的主要成分是多硫化钙，具有渗透和侵蚀病菌细胞及害虫体壁的能力，能在植物体表面形成一层药膜起保护作用。在植株发病前或发病初期喷施效果很好。石硫合剂的熬制方法是：①按1:2:10的比例，备好待用的石灰、水和两个水桶、两口大锅等。②在一口大锅内倒足水，加热至沸腾，并将预先称好的1份石灰放人锅内搅匀，使其充分溶解。③在另一口大锅内加水，将2份其搅拌均匀，并将其一次性加人石灰锅中，要用急火熬制。④边熬边搅拌，熬沸后保持50－60分钟，待锅内溶液呈深棕红色时停火。⑤过滤。过滤后溶液呈紫黑色，呈黄绿色。用此法熬制的石硫合剂一般为23－26波美度。石硫合剂的土法测定方法是：找一只白色透明的玻璃瓶，里面盛水0.5千克左右，代收葡萄公司，并标注水位线，然后将水倒出，装人熬制好的石硫合剂至水位线处，称出重量，后计算熬制石硫合剂剂量，公式为：(石硫合剂重量一水重量一瓶子重量)×115。

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